AbstractsBiology & Animal Science

Minor Lycopodium Alkaloids from Icelandic Lycopodium annotinum. Isolation, structure elucidation, and acetylcholinesterase inhibitory activity

by Díana Guðmundsdóttir 1987




Institution: University of Iceland
Department:
Year: 2013
Keywords: Lyfjafræði; Jafnar; Náttúruefni (lyfjafræði)
Record ID: 1222301
Full text PDF: http://hdl.handle.net/1946/14552


Abstract

Jafnar hafa lengi verið rannsakaðir vegna lýkópódíum alkalóíða innihalds þeirra. Sumir þessara lýkópódíum alkalóíða hafa sýnt fram á mikla andkólínesterasa virkni, en ein af viðurkenndum meðferðum við Alzheimer sjúkdóminum eru kólínesterasa hindrar. Á Íslandi vaxa fimm tegundir jafna, þar á meðal er lyngjafni (L. annotinum), sem er einn mest rannsakaði jafninn á Íslandi. Markmið þessa verkefnis var að einangra lýkópódíum alkalóíða sem finnast í litlu magni í lyngjafna, ákvarða efnabyggingu þeirra og kanna andkólínesterasa virkni þeirra in vitro. VLC þættir sem innihalda mjög skautaða alkalóíða voru kannaðar. Einangrun var gerð með SPE og HPLC. Byggingarákvörðun var gerð með kjarnsegulgreiningu (NMR) og andkólínesterasa virknin var ákörðuð in vitro með ljósgleypnimælingum. Tveir alkalóíðar fengust nægilega hreinir og í nægilegu magni til þess að hægt væri að byggingarákvarða þá. Þetta reyndust vera lannotinidine A og C, en þeir hafa ekki fundist í íslenskum lyngjafna áður. Enn fremur fannst örlítið magn af cis-ísómer lannotinidine C í blöndu með hefðbundnum trans-ísómer af þeim alkalóíða, en cis- ísómernum hefur ekki verið lýst áður. IC50 fyrir lannotinidine A var 315 μM, en ekki var hægt að finna nákvæmt gildi fyrir lannotinidine C sem var með IC50 >500 μM, en hæsti styrkurinn sem var mældur var 500 μM. Miðað við physostigmine (IC50 0.84 μM) þá er lannotinidine A veikur asetýlkólínesterasa hindri, en miðað við þá alkalóíða sem áður hefur verið lýst úr íslenskum lyngjafna þá sýnir hann aukna virkni. Club mosses have been studied for many years for their lycopodium alkaloid contents. Some lycopodium alkaloids have shown potent acetylcholinesterase inhibition, but cholinesterase inhibitors are one of the approved treatments for Alzheimer’s disease. There are five known club moss species growing in Iceland including the interrupted club moss (L. annotinum), which is among one of the most studied in Iceland. The aim of the project was to isolate minor lycopodium alkaloids from L. annotinum, to elucidate their structures and evaluate their in vitro acetylcholinesterase inhibitory activity. VLC fractions containing very polar alkaloids were examined. Isolation was performed with SPE and HPLC. The structure elucidation was done using NMR spectroscopy and the acetylcholinesterase inhibition was evaluated in vitro with the colorimetric method of Ellman. Two alkaloids were found in enough quantity and were pure enough for their structure to be elucidated with NMR. These alkaloids turned out to be lannotinidine A and C, which have not been found in Icelandic L. annotinum before. Furthermore a trace of a cis-isomer of lannotinidine C, which has not been described before, was found. The IC50 of lannotinidine A was determined to be 315 μM, but could not be precisely determined for lannotinidine C that had IC50 >500 μM – the highest concentration measured. Lannotinidine A compared with physostigmine (IC50 0.84 μM) is a weak acetylcholinesterase inhibitor; however compared with many alkaloids of the lycopodine class previously…