Abstracts Category : Other

Molecular mechanisms regulating plant infection in the rice blast fungus Magnaporthe oryzae

by Otero Adriana Illana

Magnaporthe oryzae es un hongo ascomiceto filamentoso que produce la enfermedad de la piriculariosis del arroz. Este estudio se ha centrado en la caracterizacin de dos mutantes de T-DNA de M. oryzae afectados en patognesis, M1422 y M1373. M1422 est afectado en un gen que codifica un factor de transcripcin implicado en control de polaridad (Transcription factor for polarity control 1; Tpc1). El mutante M1373 carece de una protena implicada en el transporte ncleo-citoplsmico, la exportina-5 (Exp5). Tpc1 es un regulador transcripcional con un dominio de unin a ADN del tipo Zn(II)2Cys6 que slo se encuentra en hongos filamentosos. La caracterizacin del mutante tpc1 ha permitido la identificacin de su posible mecanismo de accin, mediante la regulacin de especies reactivas de oxgeno y el control del complejo NADPH oxidasa. Los procesos de oxidacin-reduccin estn afectados significativamente en el mutante tpc1, debido a que el gen NOXD, homlogo funcional de la subunidad p22phox de la NADPH oxidasa humana est reprimido. El mutante noxD en M. oryzae no es capaz de infectar ni hojas ni races de arroz. Adems este mutante muestra defectos en la repolarizacin de los filamentos de actina durante la formacin del apresorio y en el proceso autofgico, el cual es esencial para la penetracin de hojas. Experimentos de inmunoprecipitacin han permitido identificar diferentes vas de participacin de Exp5 en la virulencia del hongo. Nuestros resultados demuestran que Exp5 interacciona con Rac1, una pequea GTPasa involucrada en la organizacin de los filamentos de actina y el crecimiento polarizado, ambos esenciales para la infeccin fngica. Exp5 interacciona adems con dos protenas quinasas activadas por mitgenos necesarias para la formacin y penetracin del apresorio, Pmk1 y Mps1. Para el estudio de la participacin de Exp5 en el metabolismo del ARN, se secuenciaron libreras de pequeos ARN de la estirpe silvestre y del mutante exp5. Estos experimentos mostraron que la mayora de los transcritos pequeos en exp5 se encuentran en menor nmero que en la estirpe silvestre, con excepcin de los que derivan especficamente de elementos transponibles, que se encuentran en mayor nmero en exp5. Experimentos Northern realizados con sondas para retrotransposones como MAGGY y RETRO5, y tARNs mostraron que el mutante tiene alterados su distribucin subcelular, lo que sugiere que Exp5 participa en la translocacin de transcritos pequeos derivados de estos elementos. El anlisis de pequeos ARNs ha llevado de forma inesperada a la identificacin de un nuevo virus ARN en M. oryzae. La protena RNA polimerasa dependiente de RNA del nuevo virus, muestra similaridades con los micovirus del tipo ourmia y con el gnero de virus de plantas ourmiavirus. Por esta razn se le ha llamado Magnaporthe oryzae ourmia-like virus (MOLV1). ABSTRACT M. oryzae is an ascomycetous filamentous fungus that causes one of the most devastating diseases of rice, the rice blast disease. This study is focused on the characterization of twoAdvisors/Committee Members: Sesma Galarraga, Ane, Rodrguez Romero, Julio L..